蔬菜農(nóng)殘儀檢測技術(shù)和檢測注意事項

1、農(nóng)殘儀檢測原理
     農(nóng)殘速測儀檢測原理是采用酶抑制法，在一定條件下。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制膽堿酯酶的活性，其抑制率與農(nóng)藥的濃度星正相關(guān)11-21。在正常情況下，酶催化代謝產(chǎn)物水解．其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在410am處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
2、農(nóng)殘速測方法
2．1試劑配制與保存
2．1．1緩沖液。用量筒量取500mL蒸餾水，先用少量(100一150 mL)的蒸餾水緩緩倒入放有緩沖   劑干粉的量杯中，用玻棒攪拌至完全溶解后將量筒中剩余的蒸餾水倒人量杯中充分?jǐn)嚢?搖勻)，待用。
2．1．2顯色劑。用刻度吸管吸5．2 mL緩沖液注入顯色劑瓶中，蓋上蓋搖勻，置于0—5℃環(huán)境中備用，切勿冷凍。
2．1．3底物。用刻度吸管吸5．2 mL蒸餾水注入底物干粉瓶中，蓋上蓋搖勻，置于嘰5 cc環(huán)境中備用。
2．2樣液制備
取干凈的蔬菜，用天平準(zhǔn)確稱取2 g，葉菜取葉片部分，果菜橫截削下一片，葉片、瓜肉等剪成I cm2，置于100 mL小燒杯內(nèi)；用吸管吸10 mL緩沖液注入小燒杯中，振蕩提取2 min左右；提取結(jié)束后靜置2—3 min，取上層清液作為樣液。
2．3儀器操作與樣品測定
2．3．1儀器預(yù)熱。接通電源，儀器自檢，自檢結(jié)束后待機預(yù)熱10 min．儀器工作穩(wěn)定后進行測量13-71。
2．3．2對照測定。向檢測板最左排比色孔中用專用的移液槍分別加10卜L酶試劑，再用250斗L移液槍吸取250斗L緩沖液于比色孔，按上下鍵選擇“啟動振板”菜單后按“確認(rèn)”鍵啟動振板10 S，振板結(jié)束后。讓酶試劑和緩沖液混合液靜置反應(yīng)10 min，用專用的移液槍向比色孔分別加入lO斗L顯色劑和10斗L底物，立即將檢測板放入托盤，按“對照”鍵測量(反應(yīng)時間設(shè)為l min)。測試結(jié)束，按“確認(rèn)”鍵顯示對照吸光度變化值。待空白對照值的吸光度變化值在0．15加．30，才可測定樣品。否則要重新做空白測定。測量結(jié)束后儀器自動保存當(dāng)前的對照值，下一次測量樣品時就可以
2．3．3樣品測定。若已完成各通道的對照測試，將檢測板上所有比色孔作為樣品測量。用不同移液槍分別給比色孔加酶液10“L／孔，加注樣品液250斗【／孔，顯色劑lO斗L／孔。操作步驟同對照測試，最后按“樣品”鍵測量，測試結(jié)束后，顯示當(dāng)前測量的樣品抑制率結(jié)果和吸光度變化值�？筛鶕�(jù)需要打印被測樣品抑制率。
2．3．4測試結(jié)果的判定。測定結(jié)果以抑制率表示。根據(jù)GB／T5009．199—2003判定要求，當(dāng)樣品對酶的抑制率≥50％時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需重復(fù)測2次以上。

3、注意事項
(1)定期校正調(diào)試、科學(xué)使用移液槍。選用250斗L和10斗L可調(diào)移液槍，將槍嘴先用清水沖洗再用純凈水沖洗，在電子天平上進行吸液量校正。移液器使用時，必須遵循器具專用原則：吸取酶、顯色劑、底物的移液器貼上專用標(biāo)簽，移取試劑時一一對應(yīng)使用。
(2)檢測室溫度要控制在20—25℃，否則會影響酶的活性，影響結(jié)果刪。若完成對照測量后，儀器關(guān)機重啟，則需重新測量對照。進行對照測量時，1 min后對照吸光度變化值應(yīng)在0．15以上，否則該酶試劑不能繼續(xù)使用。
(3)樣液制備過程中，浸提要充分，縮短時間對結(jié)果影響較大。酶試劑和樣品液或緩沖液的混合液靜置反應(yīng)時間為10 rain，反應(yīng)時間不同，結(jié)果不同。試劑從冰箱取出，先恢復(fù)至室溫，搖勻后再使用。酶、顯色劑和底物不能漏加或多加，否則對結(jié)果影響大。試劑使用時，必須遵循只出不進原則：從酶、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑．不得返回原試劑瓶中，以免污染原試劑151。若被測比色杯中有氣泡產(chǎn)生。應(yīng)排除。以免影響測量結(jié)果。
(4)測量結(jié)果抑制率A％為“一一”，表示測量結(jié)果無效�？赡苡梢韵聨讉�原因造成：試劑從冰箱取出后，未恢復(fù)到室溫進行對照測試；對照測試時間與樣品測試時間相隔太久。導(dǎo)致光照與樣品測試溫度條件相差較大；被測樣品色素干擾較嚴(yán)重；反應(yīng)試劑取用量是否準(zhǔn)確。另外，其他非測試孔空白的孔位可能也會出現(xiàn)“～一”㈣。儀器操作時，注意托盤上的孔位不能有頭發(fā)、棉絲等其他異物，如有污物或液體可用過濾紙擦干凈，以免影響光路測量。應(yīng)做好抽樣單、檢測結(jié)果等原始記錄的整理并保存好。
(5)抑制率≥50％的樣品，至少要重復(fù)檢測2次．才能確定此樣品是否合格。蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假磷類農(nóng)藥的樣品5個，檢出率為6．3％。檢出農(nóng)藥為乙酰甲胺磷、毒死蜱、三唑磷、氧化樂果。
2．4有機氯類農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果
由表5可以看出，在被檢測的80個樣品中，檢出有機氟類農(nóng)藥的樣品3個，檢出率為3．8％。檢出農(nóng)藥為三氟氯氰菊酯、三唑酮、百菌清。
4、緒論與討論
(1)從樣品檢測添加回收率來看，添加回收率均在65％一130％之間，符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。
(2)有機氯類農(nóng)藥自20世紀(jì)40年代開始使剛，7忙80年代，一些國家相繼限用和禁用，我國于1983年停止生產(chǎn)樣品分析結(jié)果顯示，畢節(jié)地區(qū)特色產(chǎn)品中雖有槍出有機氯類農(nóng)藥，但根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)來看，樣品有檢出，但不超標(biāo)，說明畢節(jié)地區(qū)特色農(nóng)產(chǎn)品是安全的。有機氯類農(nóng)藥，有的品種毒性較大，有一定的蓄積性，該類農(nóng)藥在該次檢測中也有檢出，如三氟氯氰菊酯、三唑酮、百菌清。故須加強此類農(nóng)藥使用的監(jiān)管力度。
(3)有機磷類農(nóng)藥具有高效、速效和廣譜的特點，常用作殺蟲劑，作用主要是抑制膽酯酶活性。該次檢測樣品中
有檢出乙酰甲胺磷、毒死蜱、三唑磷、氧化樂果幾種農(nóng)藥。從檢測結(jié)果分析，此類農(nóng)藥有檢出，但殘留量遠(yuǎn)低于國家限量標(biāo)準(zhǔn)，不會對畢節(jié)地區(qū)特色農(nóng)產(chǎn)品雖然衛(wèi)生指標(biāo)造成
(4)通過對畢節(jié)地區(qū)特色農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量的檢測，對比我國食品中農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)畢節(jié)地區(qū)特色農(nóng)產(chǎn)
品中農(nóng)藥殘留量低，污染少。但有農(nóng)藥檢出。希望有關(guān)部門加強監(jiān)管，加強合理使用農(nóng)藥的宣傳和指導(dǎo)，規(guī)范農(nóng)資市場，建立健全市場準(zhǔn)入產(chǎn)地準(zhǔn)出制度。杜絕劣質(zhì)農(nóng)產(chǎn)品進入市場銷售。維護全區(qū)特色農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和進出口貿(mào)易信譽。確保廣大消費者吃上安全放心的特色農(nóng)產(chǎn)品。