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白酒生產(chǎn)工藝中的孢子檢測方法

來源:  類別:技術(shù)文章  更新時間:2013-10-25  閱讀
  霉菌因糖化力較高,酶類豐富,適合釀酒生產(chǎn),是一種重要的糖化菌。隨著近年芝麻香型白酒的發(fā)展,河內(nèi)白曲的酸性蛋白酶活力也逐漸受到重視,其在芝麻香型白酒香味成分生成過程中的作用逐漸被認可,河內(nèi)白曲霉成為芝麻香型白酒釀造中糖化酶和酸性蛋白酶的重要產(chǎn)生菌。
  但我國白酒生產(chǎn)的經(jīng)驗:
  “制曲時霉菌孢子較多,釀酒時加曲量過多或發(fā)酵溫度過高等都會給成品酒帶來苦味”、“大量孢子使酒呈苦澀味或霉苦味”。霉菌培養(yǎng)后期,隨著培養(yǎng)時間的延長,水分降低、營養(yǎng)匱乏,會產(chǎn)生大量孢子。不僅如此,隨著培養(yǎng)環(huán)境越來越不適宜菌體生長,往往會有許多有害產(chǎn)物開始生成(如色素甚至毒素等),使曲產(chǎn)生異雜味甚至毒素。
  霉菌孢子對酒有比較大的危害,但霉菌的酶活力往往與麩曲老熟程度成正比,與對其酶活力需求形成尖銳的矛盾。一味追求酶活力,使白曲培養(yǎng)時間過長,菌體老化,孢子大量生成,同時霉菌麩曲用量過大,都容易使酒體澀、雜,尤其是對以優(yōu)雅著稱的芝麻香型白酒影響更大。
  孢子檢測方法:
      由于麩曲實際培養(yǎng)過程中無法精確控制時間,所以檢測孢子的產(chǎn)生更加準確合理。要實現(xiàn)檢查孢子是否已經(jīng)產(chǎn)生的目的,可以使用霉菌形態(tài)觀察或孢子計數(shù)等方法來達到。
  現(xiàn)有的方法一般有孢子計數(shù)或插片培養(yǎng)、水浸片等。
  孢子計數(shù)有光電比濁法、血球計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法等,必須使用到的儀器是孢子捕捉器,這些都需要專人操作,平板計數(shù)法更是需要幾天的時間,不能滿足生產(chǎn)實際的需要。
  而對于麩曲霉菌形態(tài)的觀察法,要把霉菌做成水片,將菌絲挑于滴有稀釋液的載玻片上,再蓋上蓋玻片,用普通光學顯微鏡觀察,這樣雖然可以看到孢子的生產(chǎn)狀態(tài),但制片時會破壞霉菌在麩皮上的生長形態(tài),以及打散孢子等,并且需要專人操作,時間也長。這些現(xiàn)存的方法都不能達到即時而又簡便的觀察麩曲生長狀態(tài),同時對操作者有一定的要求,不是麩曲工人可以操作的。
  看看麩曲有沒有長孢子,或孢子是否已經(jīng)開始飛散。
  通過比較,發(fā)現(xiàn)用立體視覺顯微鏡可以迅速、方便的觀察。
  立體視覺顯微鏡可以放大到200倍以上,同時使用反射光和透視光立體成像,可以清晰地觀察麩曲菌絲、孢子梗及孢子囊的立體形象,觀測效果極好。白曲照片見圖4。
  近年來,以景芝酒廠為代表的芝麻香型白酒已逐步成熟,研究方向也從突出典型性向優(yōu)雅細膩,使酒體更加成熟綿柔豐滿的方向發(fā)展,因此,把握合理的麩曲培養(yǎng)時間及用量,使其各種酶活力達到工藝要求,而其孢子數(shù)減到最低,對白酒生產(chǎn)尤其是芝麻香型白酒生產(chǎn)意義重大。
  試驗通過對不同培養(yǎng)時間的各種酶活力和孢子數(shù)進行對比,發(fā)現(xiàn)河內(nèi)白曲霉在孢子即將產(chǎn)生的時間,糖化力已經(jīng)達到要求,酸性蛋白酶活力也達到可接受的水平,而且再延長時間糖化力也不會有太大的增加。
  所以,選擇以孢子剛開始產(chǎn)生,24h左右作為白曲成熟時機。
  通過使用立體視覺顯微鏡直接對培養(yǎng)中的麩曲進行觀察,可方便迅速的對霉菌的孢子生長情況進行檢測,操作簡便快捷,不需專業(yè)操作人員,麩曲培菌工可直接操作。
  當然,對于麩曲的糖化力,以景芝酒業(yè)多年的生產(chǎn)實踐900U/g完全可以達到要求。蛋白酶活力的要求還不明確,但從實踐證明,目前的麩曲就可以生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的芝麻香酒。
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