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組培培養(yǎng)室對銀木種子的實驗研究

來源: http://laobandaihuo.cn  類別:技術文章  更新時間:2015-01-08  閱讀
      銀木種子的來源是比較缺乏的并且不容易無性生殖,對其推廣和應用有著直接的影響,盡管目前可以獲得的嫩枝扦插繁殖苗,但低速很難滿足市場需求銀木。因此通過組培培養(yǎng)室對其的培養(yǎng)具有重要的作用,從1980年代初,使銀木種子繁殖的初步研究,只會讓大量的愈傷組織和不定芽。
  
      將外植體嫩莖段接種到組培培養(yǎng)室的培養(yǎng)基上,以MS為基本培養(yǎng)基,選用分裂素進行交叉組合試驗,每個組合接種20瓶,重復3次統(tǒng)計其生長情況,篩選增殖階段最適宜的培養(yǎng)配方。以上培養(yǎng)基附加蔗糖30g/L,卡拉膠6.5g/L,pH5.6,溫度25℃,光照強度2000~3000lx,光照12h/d。
  
     組培培養(yǎng)室試驗前期關鍵在于外置體的選擇。試驗采集銀木幼樹型材料3個部分(頂芽、中部腋芽、下部腋芽)進行初誘導篩選,使用0.1%HgCl2劑滅菌,根據(jù)材料的木質化程度選擇滅菌時間,選擇出污染率低、芽初萌快外植體的最佳部位。選擇中部的腋芽做組培培養(yǎng)室的外植體比較合適,短期內可建立銀木無菌系,為以后外置體選擇節(jié)省時間和勞力。
  
      通過組培培養(yǎng)室的試驗可知,頂芽誘導出芽的時間最短,因頂芽暴露在空氣中時間短,菌類積累極少,處理后的污染極少,而頂芽的組織太嫩,滅菌過程難以控制導致芽體容易受傷,直接影響頂芽的誘導效果。從組培培養(yǎng)室發(fā)現(xiàn)中、下部腋芽污染較高,由于頂芽以下部位的分生組織沉積,材料的木質化強弱決定了誘導時間的長短,中部芽的分生能力強,誘導出的腋芽粗壯。
  
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